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详细内容

皮下移植瘤模型

1、简介

裸鼠常被用作肿瘤体内耐药性和肿瘤细胞成瘤性的研究对象,裸鼠肿瘤模型可以保留原发肿瘤本身的形态特征及遗传性。裸鼠成瘤实验是研究人类肿瘤生物特性以及肿瘤治疗的实验,且因为移植性裸鼠肿瘤模型具有成瘤率高、均一性好,能够准确反应肿瘤的生物学特性等优点,因此通过培养瘤细胞来建立裸鼠皮下移植瘤模型,可以为肿瘤治疗的相关研究提供可靠的动物模型。

裸鼠在皮下移植瘤模型的建立上具有重要作用。由于裸鼠存在免疫缺陷,在一定情况下 ,它不排斥异种动物的组织移植,因此利用其建立的可移植性实验动物肿瘤模型成为了人类研究肿瘤的理想的动物模型,裸鼠成瘤实验成了建立肿瘤动物模型的一项常规实验。如有研究者建立了人绒毛膜癌IAR细胞裸鼠移植瘤模型以观察人绒毛膜癌的生物学特性。还有研究者利用裸鼠有效建立U87胶质瘤皮下移植瘤模型,为胶质瘤的治疗研究提供了动物模型。常规成瘤的细胞:Hep-G2 (肝癌),Hep2 (喉癌),NCI-H460(大细胞肺癌),A431(表皮癌),SK-OV-3 (卵巢癌),MCF-7 (乳腺癌) SKBR3,A375/B16-F10(人黑色素瘤胞),SGC7901人胃肿瘤细胞,KB人口腔表皮样癌细胞。

 

2、原理

皮下移植瘤模型大多通过体外培养癌细胞,待其生长到对数期,收集细胞,制成细胞悬液,采用皮下注射方式接种至Balb/c Nude裸鼠或NOD/SCID小鼠腋下皮下,连续观察4周,用游标卡尺隔天测量瘤体大小来评估各实验组的瘤体生长状况。


3、实验过程详解

3.1 实验材料

各类手术器械、1mL注射器、游标卡尺、Balb/c Nude裸鼠或NOD/SCID小鼠。


3.2 实验过程

1 体外培养癌细胞,取对数生长期癌细胞,收集制成浓度为1×107/150μL(理论值,实际为t25方瓶一瓶细胞收集为150μL的细胞悬液)的细胞悬液备用。

2 本实验以Balb/c Nude裸鼠为例,裸鼠接种前右侧腋下消毒。

3 1mL注射器重悬细胞,吸取细胞。

4 针头斜面朝上,距离接种部位约1cm处进针,待针头在皮下穿行一半时,缓慢注射癌细胞,可见接种处生起一小包,提示接种成功。

5 接种完毕旋转拔出针头,并将针口处将细胞悬液往回赶。

6 每只Balb/c Nude裸鼠接种体积为150mL细胞悬液。

7 裸鼠成瘤接种后,每隔2天观察肿瘤生长情况,生成肿瘤后,每隔1天用游标卡尺观察测量记录肿瘤一次,连续观察35天。


4、注意事项

1 裸鼠应喂养一周后方可进入实验。

2 接种前掌握好接种的细胞量。

3 接种时注意针头斜面朝上,掌握好皮层,不过过浅过深,接种完毕将针口处将细胞悬液往回赶。

4 理论在接种1周-2周左右即可有肿瘤长出来,要随时观察。

 

5、参考文献

[1] 叶园英,黄煜,颜莉莉,赵淑萍,张磊,刘倩倩. 人子宫内膜癌裸 鼠皮下移植瘤模型的建立[J]. 山东医药. 2016(35).

[2] 詹光熙,彭书敏,郭晓青.人卵巢癌裸鼠卵巢原位移植瘤模型的构建[J].  石河子大学学报(自然科学版). 2017(05).

[3] 李静,邢辉,高庆蕾,卢运萍,邬素芳,马丁.人卵巢癌裸鼠原位移植瘤模型的建立及其生物学特性研究[J].  中华妇产科杂志2003(06).

[4] 李宁,张晓晔,蒋中秀,刘洋,李雪娇. 小鼠Lewis肺癌原位模型的建立[J]. 中国实验动物学报. 2014(05).

[5] 徐静,李旭. 肝癌动物模型的建立[J]. 实用肝脏病杂志. 2005(02).

[6] 韩克起,顾伟,胡侠,张亚妮,黄雪强,刘岭,苏永华,凌昌全. 小鼠肝癌原位移植模型的建立及生物学特性[J]. 中西医结合学报.2004(05).



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