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详细内容

创伤性脑损伤(TBI)

1、简介

创伤性脑损伤(TBI)是一个全球严峻的公共卫生和社会经济问题,致残、致死率高。

目前有以下几种TBI动物模型被广泛应用于实验研究:重物坠落损伤模型、液压冲击损伤模型、控制性皮质损伤模型、穿透弹道式脑损伤模型性、爆炸伤模型。

虽然TBI动物模型复制了临床上观察到的大部分的组织病理学和功能结果,但现有的动物模型不能完全复制人类TBI,研究人员在使用实验性TBI模型时需要谨慎考虑,以确保选择最合适的模型来解决研究问题。

Feeney法制作自由落体脑挫伤模型是常用的创伤性性脑损伤模型,适用于损伤病理学生理学,药理学等研究

实验动物包括大鼠,小鼠等。

 

2、原理

创伤性脑损伤(TBI)采用改进的Feeney法制作自由落体脑挫伤模型。

大鼠麻醉后,俯卧于立体定位仪上,暴露右侧颅骨,用牙科钻钻直径5 mm的圆形骨窗,保持硬脑膜完好无损。采用自由落体打击装置造成中重型右顶脑挫裂伤,缝合头皮。

 

3、实验过程详解

3.1 实验材料

各类手术器械、颅脑损伤仪、牙科钻、骨蜡、SD大鼠。

 

3.2 实验过程

1 大鼠术前禁食12h,用7%水合氯醛腹腔注射(5 mL/kg)麻醉。

2 固定鼠牙,连接耳杆,俯卧固定于立体定位仪上。

3 确认大鼠固定好后,将大鼠顶枕部鼠毛剪去,常规消毒。

4 顶枕部中线切开头皮长约2cm,钝性剥开软组织、骨膜,暴露右侧颅骨。

5 通过立体定位仪确认人字缝前2 mm,颅骨中线旁2.5 mm,用牙科钻钻直径5 mm的圆形骨窗,注意开窗深度,保持硬脑膜完好无损。

6 采用自由落体打击装置,以25 g砝码从40 cm高处打击,力度25g*40cm=1000g*cm的打击力度,造成中重型右顶脑挫裂伤。

7 缝合头皮;

8 术后放回笼中,自由饮食饮水。


3.3 模型验证

1 mNSS法神经功能缺损评分:


大鼠神经损伤严重缺损评分(mNSS)标准

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对大鼠运动、感觉、平衡和反射四方面进行评测,总分最高为18 分,分数越高,表示动物的神经损伤越严重。评分分别在造模后不同时间段进行。mNSS评分结果显示,造模后模型组的评分明显高于假手术组,且直到第12天仍在较高的评分,显示造模后大鼠的神经运动功能降低


2 病理学观察:

大体病理变化:所有创伤鼠均见明显、广泛的蛛网膜下腔出血。胼胝体、小脑上臂、脑干等处可见散在的点片状出血灶,符合TBI改变。

HE染色光镜检查对照组:神经元呈三角形或锥体形,胞核圆形或椭圆形,蓝染;部分神经元核大圆形,核空亮,核中央可见核仁。神经胶质细胞核深染,数量少。损伤组损伤灶神经元数量明显减少,神经元胞质嗜伊红染色增强,胞核形状不规则,部分神经元胞核固缩、深染,核仁不明显或消失。损伤灶周围出现明显的神经胶质细胞浸润。


4、注意事项

1 撞击后,大鼠出现短暂的四肢抽搐、呼吸暂停数秒,或者鼻腔出血、小便失禁等各种症状表现属正常现象。

2 术后应用骨蜡封窗。

 

5、参考文献:

[1] 马登磊,祝艳秋,张丽,杨翠翠,李雅莉,张兰. 中药山茱萸环烯醚萜苷改善创伤性脑损伤大鼠行为学表现[J]. 2014年中国药学大会暨中国药师周.

[2] 宋扬,韩一生,毕龙. 创伤性脑损伤大鼠动物模型及其评价体系的建立[J]. 中华神经外科疾病研究杂志,2009(6):521-524.

[3] 吴国建,王次东,李光照,张阳. 创伤性脑损伤后大鼠脑组织12/15-脂氧合酶的表达及作用研究[J]. 医学研究生学报. 2011(08).

[4] 楚燕飞,李兵仓,陈菁,王建民,张良潮,陈志强,康建毅. 大鼠爆炸性脑创伤模型建立[J]. 第三军医大学学报. 2006(06).



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