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详细内容

急性胰腺炎(AP)

1、简介

急性胰腺炎(AP)是临床常见的急腹症之一,具有起病急、发展迅猛、并发症多、病死率高等特征,严重威胁人类生命健康。AP病死率约5%,其中重症急性胰腺炎(SAP)病死率高达17%-20%。目前AP的发病机制尚未完全阐明,建立合适的AP动物模型对研究AP的发病机制及其治疗措施具有重要意义。AP动物模型的建立方法一般按照入侵性、非入侵性,或在体、离体这两种方式进行分类。现用最多的牛磺胆酸钠注胰腺组织致AP法,腹正中切口进人腹腔,在胰头及胰尾部实质内定点注磺胆酸钠溶液。该方法简便,易于操作,省时省力。

 

2、原理

大鼠术前12h禁食,自由饮水,大鼠麻醉,无菌条件下行上腹正中切口,寻找十二指肠降部及胆总管走向。手术显微镜下,用微量药液注射泵从十二指肠降部的肠壁处注射5%牛磺胆酸钠,肉眼下,大鼠胰腺组织出现充血、水肿后开始后续实验。

 

3、实验过程详解

3.1 实验材料

各类手术器械、1mL注射器、牛磺胆酸钠、SD大鼠。

 

3.2 实验过程

1 术前12 h禁食,自由饮水。

2 7%水合氯醛腹腔注射(5 mL/kg)麻醉。

3 无菌条件下行上腹正中切口,寻找十二指肠降部及胆总管走向。

4 手术显微镜下,靠近肝门处暂时钳夹胆总管。

5 找到胰胆管注入十二指肠降部的肠壁处,并用左手托起,微量药液注射泵吸取5 %牛磺胆酸钠溶液,右手持针小心穿刺入胰胆管,可明显看见针头在胰胆管穿刺,注射剂量1.0 mL/kg,注射速度0.2 mL/min,注射持续10 min。

6 肉眼下,大鼠胰腺组织出现充血、水肿后开始后续实验。

7 逐层缝合,关腹。

8 假手术组仅翻动胰腺后,关腹。

 

3.3 模型验证

1 肉眼观察:SAP组大鼠腹腔有少量血性腹水,大网膜、肠系膜上见大量皂化斑,胰腺肿大,有大片黄色坏死灶。显微镜下,胰腺组织大片凝固性坏死、白细胞浸润、血管破裂出血。

2 组织病理学观察:模型组胰腺腺泡细胞肿胀,可见灶性坏死,腺泡细胞间有大量炎症细胞浸润;小叶排列紊乱,其间充斥大量炎性渗出;坏死区内腺泡结构消失,胞核溶解;叶间隙增宽,间质微血管破裂,大量红细胞溢出;病变严重程度随术后时间延长而加重,综合评分以12h改变最为明显。假手术组除部分胰腺腺泡细胞水肿外,小叶结构存在,间质清晰,间质内偶见炎症细胞浸润,且随时间延长病理改变逐渐减轻。

 

4、注意事项

1 暂时钳夹胆总管不要忘记。

2 注射进针时多练习手法,尽量一次性成功。

3 注射过程中要慢,边注射边观察。

4 术后随时观察大鼠情况,及时做好记录。


5、参考文献

[1] 陈占峰,陈启龙. 重症急性胰腺炎大鼠模型制作方法的改进[J]. 新疆医科大学学报. 2008(04):100-101+104.

[2] 程振兴,唐忠明,余卫平,张南,郑曙云,欧希龙. 一种小鼠胆源性重症急性胰腺炎模型建立方法的改进[J]. 中华危重病急救医学. 2016 (04).

[3] 赖铭裕,梁志海,唐国都,孙学成. 腹腔注射左旋精氨酸诱导急性坏死性胰腺炎大鼠模型[J]. 世界华人消化杂志. 2006(22).

[4] 谷俊朝,王宇. 急性胰腺炎动物模型的研究进展[J] 国外医学外科学分册. 2005(06).



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