DNA_RNA提取、纯化

一、DNA/RNA提取、纯化

从检测样本中提取基因组DNA和总RNA后，在经过核酸提纯，能够去除混杂的蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。博艾迈迪森生物可以提供从不同的材料样本中提取基因组DNA和总RNA，及纯化技术服务。

核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作 。

二、影响RNA提取的因素

1、材料

新鲜，切忌使用反复冻融的材料，如若材料来源困难，且实验需要一定的时间间隔。可以先将材料贮存在TRIzol或样品贮存液中，于-80℃或-20℃保存。如要多次提取，请分成多份保存，液氮长期保存，-20℃短期保存。

2、样品破碎及裂解

根据不同材料选择不同的处理方法：

1 培养细胞：通常可直接加裂解液裂解。

2 酵母和细菌：一般TRIzol可直接裂解，对于一些特殊的材料可先用酶或者机械方法破壁。

3 动植物组织：先液氮研磨和匀浆，后加裂解液裂解。期间动作快速，样品保持冷冻，样品量适当，保证充分裂解，为减少DNA污染，可适当加大裂解液的用量。

3、纯化

在使用氯仿抽提纯化时，一定要充分混匀，且动作快速。

经典的纯化方法，如 LiCl 沉淀等，虽然经济，但操作时间长，易造成 RNA 降解。

柱离心式纯化方法：抽提速度快，能有效去除影响 RNA 后续酶反应的杂质，是目前较为理想的选择。