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SD乳大鼠原代小胶质细胞培养实验动物 新生 SD 乳大鼠。 主要试剂 胎牛血清,DMEM/F12,多聚赖氨酸,胰蛋白酶等。 实验步骤 1 取材:取新生 SD 乳大鼠,浸入 75 %酒精中消毒,取出后剪下头颅,掀开头盖骨,取出大脑,放入冰冷的PBS液中,清洗后放入另一干净的培养皿中。解剖显微镜下剥离脑膜,去除海马、中脑等,分离出大脑皮质,出血点必须去掉。 2 消化组织收集小胶质细胞:收集好皮质后,放入装有冷的 PBS液的培养皿中稍加洗涤,剪碎,转入离心管中,然后吸除PBS。加入 0.025%胰酶 3 mL,放入37℃培养箱中消化至少15 min,出现聚团现象发生为止。消化过程中每 5 min 自培养箱中取出稍加晃动,接着加培养液,终止消化。 3 小胶质细胞纯化:采用直立手摇法 +差速贴壁法。
技术应用 细胞炎症模型构建、重金属细胞毒性反应,小胶质免疫功能研究等。 难点 细胞不增殖,需反复多次培养,杂细胞多不易剔除,耗时长,中老年鼠分离难度大。
细胞形态展示 纯化后的小胶质细胞 100x 14天 小胶质细胞 100x 慢病毒感染 实验价格/周期咨询 上一篇新西兰兔膝骨关节原代软骨细胞分离培养下一篇原代细胞培养 |