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SD乳大鼠原代小胶质细胞培养实验动物 新生 SD 乳大鼠。 主要试剂 胎牛血清，DMEM/F12，多聚赖氨酸，胰蛋白酶等。 实验步骤 1 取材：取新生 SD 乳大鼠，浸入 75 %酒精中消毒，取出后剪下头颅，掀开头盖骨，取出大脑，放入冰冷的PBS液中，清洗后放入另一干净的培养皿中。解剖显微镜下剥离脑膜，去除海马、中脑等，分离出大脑皮质，出血点必须去掉。 2 消化组织收集小胶质细胞：收集好皮质后，放入装有冷的 PBS液的培养皿中稍加洗涤，剪碎，转入离心管中，然后吸除PBS。加入 0.025%胰酶 3 mL，放入37℃培养箱中消化至少15 min，出现聚团现象发生为止。消化过程中每 5 min 自培养箱中取出稍加晃动，接着加培养液，终止消化。 3 小胶质细胞纯化：采用直立手摇法 +差速贴壁法。
技术应用 细胞炎症模型构建、重金属细胞毒性反应，小胶质免疫功能研究等。 难点 细胞不增殖，需反复多次培养，杂细胞多不易剔除，耗时长，中老年鼠分离难度大。
细胞形态展示 纯化后的小胶质细胞 100x
14天 小胶质细胞 100x
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