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​动物实验 大鼠麻醉实验流程

动物实验 大鼠麻醉实验流程

  一、SD大鼠的麻醉


  1、SD大鼠腹腔麻醉


  把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。


  乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。


  乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。


  2、SD大鼠吸入麻醉


  可以作一个小金鱼缸 (四方形) 算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。


  3、SD大鼠经口气管插管


  腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。


   二、异氟醚大鼠麻醉


  安全且具有麻醉科特色。


  我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。使用时打开盖子,将杯子对着大鼠,大鼠顺势会自己进去,然后竖起杯子盖上盖,连抓大鼠都省了,超级安全!然后接麻醉机(临床淘汰的机型,不过作试验足够了),注意要事先准备好连接管道(临床上各种管子都是可以互相接口的),打开挥发器就行了。我们一般先开大,大鼠一会儿不动了就麻好了(杯子要求至少半透明)。


  注:一般同时接着氧气,所以安全有保障,而且要观察着动物,不动就行了,别麻过了!


  手术过程中的维持麻醉一般也采用吸入麻醉,与诱导时基本类似。取出诱导好的大鼠,快速固定四肢在操作板上,给大鼠口鼻处罩上剪下的合适注射器(好像是20或30ml注射器)前端,注射器头接诱导时的麻醉管道,连接到麻醉机上,一般维持时开到2,同时供氧,没有给它们插过气管插管,也没有出现窒息的(至少我没见过)。可作除开胸外的手术,一般切皮处给予少量局麻。作过颈部血管手术和股动静脉穿刺置管效果都很好。


   三、大鼠插管麻醉


  给大鼠做过气管插管,用的是改装过的小儿一次性喉镜(不用也可以),插管用的是16G的穿刺针(感觉稍有点短,但可以用的),插管时打开台灯,照着颈部位置,这是挑起舌头(其实用个弯镊子也可以的),就可以看到大鼠的声门,并不是很高,在灯光照射下,声门就像个小窗户似的,一开一合的,很明显。但是由于空间较小,只能用一只眼看,插管时视线部分受阻,大鼠咽部反应,插管时大鼠有动作,因此插管时不要着急,先将导管放在声门附近,看准了再插。感觉不是很难,尤其是干过麻醉的人,大家都可以试一下。


   四、戊巴比妥钠麻醉大鼠


  1、用戊巴比妥钠30mg/kg,不是巴比妥钠!应该配制的浓度3mg/ml,1ml/100g 体重,即30mg/kg。 如果此剂量不产生麻醉作用,说明巴比妥钠质量有问题。


  2、戊巴比妥钠,2%的,就是100ml纯水加2克药,大鼠用0.2ml/100g。


  3、戊巴比妥钠,1.5%的,就是100ml纯水加1.5克药,大鼠用0.2ml/100g,即30mg/kg,2%戊巴比妥钠50mg/kg,麻醉时间约为2小时左右。书上推荐的剂量是30~50mg/kg。做手术的30mg,麻醉不深。


  4、3%的戊巴比妥钠,1ml~1.5ml/kg,但要体重称准。


  5、戊巴比妥钠,40mg/kg,但不安全,用水合氯醛腹腔注射比较安全,300mg/kg。或是用乌拉坦。用复合麻醉,2小时左右很有效。


  配方:


  戊巴比妥钠:0.886g


  水合氯醛:4.25g


  硫酸镁:2.12g


  无水酒精:14.25ml


  丙二醇:33.8ml


  去离子水定容至100ml


  用量:0.25ml/100g


  6、2%戊巴比妥钠50mg/kg,书上推荐的剂量是40~50mg/kg(ip);或者苯巴比妥钠+乙醚麻醉,效果也可以.。


  7、在建立肠道缺血再灌注损伤模型中使用戊巴比妥钠,是沿用了很多同事的方案。使用中麻醉很平稳。效果很不错。估计肾脏移植模型和肠道相差不大,不知对否。


   


  目前,上海基尔顿生物,主营实验技术服务,如想了解动物实验的更多内容,欢迎来电咨询4009631028,我们将热情为你服务!


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